Plasenta merupakan organ multifungsi yang melakukan pertukaran zat antara embrio dan ibu, membentuk toleransi imun terhadap jaringan janin, dan mengarahkan kondisi endokrin ibu untuk penerimaan dan pemeliharaan kehamilan. Kondisi internal ibu berubah selama kehamilan, terutama pada sistem kardiovaskular, paru, kekebalan tubuh, dan metabolisme. Hal ini disarankan sebagai respons adaptif kehamilan dengan faktor turunan plasenta. Beberapa faktor yang berkaitan dengan plasenta telah dilaporkan, yang disarankan untuk memodulasi kondisi fisiologis ibu untuk mendukung pemeliharaan kehamilan, mobilisasi nutrisi, persalinan, dan laktasi.
Di antara hewan peliharaan, plasenta anjing menunjukkan fisiologi reproduksi yang unik, yang memiliki kapasitas rendah untuk sintesis steroid. Profil progesteron (P4) pada masa kehamilan mirip dengan siklus estrus pada betina yang tidak hamil. Tidak ada peningkatan estrogen (E2) yang luar biasa sebelum proses melahirkan. Oleh karena itu, baik P4 maupun E2 tidak berfungsi sebagai penanda yang berguna untuk pemantauan kehamilan pada anjing. Akibatnya, identifikasi penanda baru diperlukan untuk memantau perkembangan kehamilan anjing. Saat ini, relaxin (RLN) dianggap sebagai satu-satunya penanda yang berharga untuk anjing hamil. Berasal dari plasenta, RLN anjing dapat dideteksi dalam darah ibu sekitar minggu ketiga atau keempat kehamilan.
Waktu timbulnya perubahan spesifik kehamilan telah diperkirakan, termasuk pembentukan kantung embrio (sekitar hari ke-19), pembesaran rahim yang teraba (hari ke-21), ditemukannya detak jantung janin (hari ke-24), peningkatan prolaktin darah (hari ke-35), dan peningkatan prolaktin darah (hari ke-35). dan rincian janin radio-buram (hari ke 46) [8]. Proses plasentasi anjing dimulai sekitar hari ke-14 saat kantung kuning telur plasenta terbentuk dan berlanjut hingga hari ke-15 saat kantung alantois mengembang, dan hari ke-20 saat terbentuknya membran korioallantois.
Plasenta korioallantois yang lengkap membentuk struktur penghalang bagi janin terhadap mikroorganisme menular dan molekul beracun serta berfungsi untuk suplai nutrisi dan oksigen. Pemahaman yang lebih baik mengenai ekspresi gen spesifik plasenta tampaknya tidak hanya mencerminkan proses pembentukan plasenta tetapi juga fungsi plasenta yang diperlukan untuk kesehatan janin. Secara umum, faktor humoral yang dilepaskan dari plasenta mempengaruhi perkembangan kehamilan, namun keterlibatan plasenta anjing seringkali tidak teridentifikasi. Kami menyelidiki gen spesifik dalam plasenta anjing dan menganalisis dinamika darah dari protein yang diterjemahkan.
Eksosom adalah jenis vesikel ekstraseluler (EV) terkecil, dengan diameter 30-150 nm [5, 43], yang disekresikan oleh banyak jenis sel. Eksosom merangkum berbagai muatan biologis, seperti asam nukleat, lipid, dan protein. Transportasi oleh eksosom ini dapat mempengaruhi fungsi sel target dan melakukan komunikasi sel ke sel. Pada manusia dan tikus hamil, eksosom yang berasal dari plasenta ditemukan dalam sirkulasi ibu melintasi penghalang plasenta dan mencapai jumlah maksimum pada saat cukup bulan.
Eksosom yang diturunkan dari plasenta disarankan untuk berpartisipasi dalam proses normal perkembangan plasenta dan toleransi imun ibu. Asam nukleat bebas sel yang ditransfer oleh eksosom memiliki kemungkinan untuk meningkatkan proses pensinyalan sel pada sel penerima tidak hanya dalam kisaran fisiologi normal tetapi juga dalam kondisi patologis. Namun, penampakan dan fungsi eksosom yang berkaitan dengan kehamilan anjing masih belum jelas dan perlu dikonfirmasi.
Tujuan khusus dari penelitian ini adalah untuk memperjelas gen yang berekspresi tinggi pada plasenta anjing normal dan untuk memverifikasi kemungkinan transisi produk translasi ini ke dalam darah ibu. Kami memvalidasi dinamika faktor kandidat dalam masa kehamilan dan mengusulkan kegunaannya untuk diagnosis kehamilan dini dan pemantauan perjalanan kehamilan yang sehat. Selain itu, RNA diketahui dilepaskan dari plasenta yang tertanam dalam eksosom, sejenis vesikel ekstraseluler.
Di sini, keberadaan RNA bebas sel dalam serum wanita hamil juga dikonfirmasi. Spesimen RNA dimurnikan dari plasenta anjing normal yang sehat dan diterapkan pada analisis RNA-Seq. Ekspresi gen yang sering dikonfirmasi oleh RT-PCR menggunakan plasenta dari individu dan ras lain. Relaxin (RLN) 2, lipocalin (LCN) 2, dan penghambat jalur faktor jaringan (TFPI) 2 dipilih sebagai gen dengan ekspresi tinggi dan spesifik plasenta. Dengan western blot, ketiga faktor tersebut terdeteksi dengan jelas dalam serum wanita hamil.
Analisis kuantitatif menunjukkan bahwa jumlah RLN2 meningkat secara signifikan sejak tidak hamil hingga hari ke 41 kehamilan. Mengenai LCN2 dan TFPI2, kadar protein serum meningkat selama kehamilan, namun perbedaan statistik tidak terdeteksi. Kami mengkonfirmasi keberadaan eksosom dalam darah anjing hamil dan kemungkinan sarana transportasi untuk faktor kandidat yang diturunkan dari plasenta.
Eksosom ditemukan di semua serum hamil; namun, persentasenya kurang dari 6% dari total vesikel ekstraseluler. RNA bebas sel yang terkait dengan RLN2 terdeteksi, namun tidak ada peningkatan yang dikonfirmasi selama kehamilan. Kami menemukan gen spesifik di plasenta anjing dan transisi protein yang diterjemahkan ke dalam darah. Faktor-faktor ini dapat menjadi alat yang berguna untuk penelitian kehamilan anjing dan pemantauan manajemen reproduksi. Eksosom dan RNA bebas sel tidak valid dalam reproduksi anjing.
Penulis: Lita Rakhma Yustinasari, drh., M.Vet.
Informasi detil dari riset ini dapat dilihat pada tulisan di bawah ini.
Nama jurnal: The Journal of Veterinary Medical Science
Link jurnal: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC10849861/
Baca juga: Apakah Hanya Anjing Pembawa Virus Rabies?
