Meskipun aspirin telah banyak digunakan karena khasiat anti-inflamasinya, efek samping dan keterbatasannya menyoroti perlunya alternatif terapi baru. Baru-baru ini, turunan asam salisilat baru, asam 2-3benzoat, telah muncul sebagai pengganti potensial untuk ASA, menawarkan sintesis yang lebih sederhana, ramah lingkungan, dan profil keamanan yang menjanjikan. Selain itu, ia menunjukkan potensi dalam menurunkan ekspresi COX-2 pada splenosit. Penurunan ekspresi COX-2, bersamaan dengan penurunan sitokin pro-inflamasi dan penanda stres oksidatif, menunjukkannya sebagai agen terapi yang menjanjikan untuk berbagai kondisi inflamasi.
Efek ini dapat membantu mengurangi stres oksidatif selama peradangan dan mungkin terkait secara linier dengan mekanisme anti-inflamasi 3-CH2Cl.
Secara keseluruhan, 3-CH2Cl merupakan senyawa yang menarik dengan beragam sifat kimia dan farmakologis, yang menjanjikan untuk berbagai aplikasi baik dalam penelitian maupun industri. Potensi ini muncul dari keterbatasan dan efek samping yang terkait dengan aspirin, khususnya iritasi gastrointestinal, gangguan pendarahan, dan potensi komplikasi seperti sindrom Reye. Namun, untuk mendukung pernyataan ini, mekanisme molekuler aktivitas antiinflamasi yang dimediasi 3-CH2Cl perlu dijelaskan. Untuk menjawab pertanyaan ini, kami menstimulasi tikus Balb/C dengan LPS dosis tinggi, dan dosis analgesik dan antiinflamasi oral tunggal 3-CH2Cl.
Kelemahan ini mencakup risiko iritasi gastrointestinal, gangguan pendarahan, dan potensi komplikasi seperti sindrom Reye, khususnya pada populasi anak-anak. Pengembangan turunan baru asam salisilat menjanjikan dalam mengatasi kekurangan ini, berpotensi mempertahankan manfaat aspirin sambil meminimalkan efek sampingnya. Baru-baru ini, turunan asam salisilat baru yang disebut asam 2-3 benzoat diperkenalkan sebagai senyawa alternatif potensial untuk menggantikan ASA. Sintesis 3-CH2Cl relatif sederhana dan ramah lingkungan.
Dengan menggunakan kondisi basa berair bifasik, 3-CH2Cl terbentuk secara spontan ketika senyawa prekursor 3-klorometilbenzoilklorida bereaksi dengan SA di bawah paparan radiasi gelombang mikro 600 Watt atau metode refluks yang diinduksi panas selama 5 menit. Tidak seperti ASA, yang menghasilkan produk degradasi asam salisilat dengan cepat, tidak ada produk degradasi seperti asam salisilat yang diamati dengan 3-CH2Cl hingga 3 tahun pada suhu 25â—¦ C dengan kelembaban relatif 75,5%. Pengamatan histopatologi pada tikus yang diobati dengan 3-CH2Cl menunjukkan pengurangan erosi mukosa lambung yang signifikan dibandingkan dengan ASA pada konsentrasi yang sama. Selain itu, pengobatan dengan 3-CH2Cl tidak membahayakan fungsi hati, jantung, paru-paru, atau ginjal pada tikus.
Induksi ekspresi COX-2 dipicu oleh beberapa jalur, seperti reseptor tol-like yang diaktifkan dan jalur NFkβ. Percobaan docking in-silico dari berbagai senyawa yang mengandung asam salisilat dengan manusia.
Aktivitas analgesik, antipiretik, dan antiinflamasi optimal dari 3-CH2Cl mencapai puncaknya pada dosis 120 mg/kg pada tikus atau dosis 60 mg/kg pada mencit, setara dengan ~350 mg/60 kg berat badan pada manusia. Konsentrasi prostaglandin dalam darah masih dalam penyelidikan. Selain itu, 3-CH2Cl menunjukkan hasil yang menjanjikan sebagai agen antitrombotik, sebagaimana dibuktikan oleh berkurangnya kejadian agregasi trombosit dan waktu perdarahan ekor yang memanjang setelah pemberian oral.
Sintesis dan persiapan tablet 3-CH2Cl
Sintesis 2-3-benzoat dilakukan menurut metode yang dipublikasikan sebelumnya. Untuk menyiapkan tablet 3-CH2Cl, metode kompresi langsung dilakukan. Singkatnya, 9,38% Neusilin digunakan untuk menghomogenkan 300 mg 3-CH2Cl. Mesin single punch digunakan untuk mengompresi tablet akhir.
Tablet akhir, yang mengandung 300 mg ASA atau 3-CH2Cl, dinilai berkenaan dengan kekerasan, kerapuhan, waktu hancur, dan parameter pelarutan obat. Untuk menyesuaikan konsentrasi splenosit hingga mencapai 5 106 sel/ml, splenosit diwarnai dengan 0,5% trypan blue dan dihitung di bawah mikroskop cahaya.
Pengukuran COX-2 endogen limpa dengan flow cytometry
Splenosit dicuci dengan 0,5% BSA dalam PBS, disentrifugasi selama 5 menit pada 1800 rpm, dan supernatan dibuang. Untuk pewarnaan intraseluler, splenosit disuspensikan kembali dengan eBioscience.
Buffer Permeabilisasi dan diinkubasi selama
Splenosit dicuci dua kali dan disuspensikan kembali dalam 0,5% BSA dalam PBS. Sepuluh μg antibodi APC Anti-Mouse COX-2 clone sc-19999 ditambahkan ke dalam sel-sel limpa. Setelah pencucian lebih lanjut dan penambahan buffer permeabilisasi, sel-sel limpa difiksasi dengan buffer fiksasi BD Cytofix, dan dianalisis dengan flow cytometry menggunakan flow cytometer FACSCalibur dan Flowing Software. Dua belas tikus jantan BALB/C diperoleh dari Pusat Farmasi-Veteriner Surabaya, Indonesia.
Penulis: Prof. Dr. Jusak Nugraha, dr., Sp.K., M.S.
Link: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1098882324000601
Baca juga: Senyawa Epigallocatechin 3-O-gallate sebagai Terapi Adjuvant Periodontitis
